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Treg cell induction after depletion of platelets Emfret貨號R300 in vivo

更新時間:2024-03-23   點擊次數:1389次

Abstract

Platelets are a rich source of many cytokines and chemokines including transforming growth factor β 1 (TGF-β1). TGF-β1 is required to convert conventional CD4+ T (Tconv) cells into induced regulatory T (iTreg) cells that express the transcription factor Foxp3. Whether platelet contents will affect Treg cell properties has not been explored. In this study, we show that unfractionated platelet lysates (pltLys) containing TGF-β1 efficiently induced Foxp3 expression in Tconv cells. The common Treg cell surface phenotype and in vitro suppressive activity of unfractionated pltLys-iTreg cells were similar to those of iTreg cells generated using purified TGF-β1 (purTGFβ-iTreg) cells. However, there were substantial differences in gene expression between pltLys-iTreg and purTGFβ-iTreg cells, especially in granzyme B, interferon γ, and interleukin-2 (a 30.99-, 29.18-, and 17.94-fold difference, respectively) as determined by gene microarray analysis. In line with these gene signatures, we found that pltLys-iTreg cells improved cell recovery after transfer and immune suppressive function compared with purTGFβ-iTreg cells in factor VIII (FVIII)–deficient (F8null, hemophilia A model) mice after recombinant human FVIII (rhF8) infusion. Acute antibody-mediated platelet destruction in F8null mice followed by rhF8 infusion increased the number of Treg cells and suppressed the antibody response to rhF8. Consistent with these data, ex vivo proliferation of F8-specific Treg cells from platelet-depleted animals increased when restimulated with rhF8. Together, our data suggest that pltLys-iTreg cells may have advantages in emerging clinical applications and that platelet contents impact the properties of iTreg cells induced by TGF-β1.

摘要

血小板是許多細胞因子和趨化因子的豐富來源,包括轉化生長因子 β 1 (TGF-β1)。TGF-β1 是將常規 CD4+ T (Tconv) 細胞轉化為表達轉錄因子 Foxp3 的誘導調節性 T (iTreg) 細胞所必需的。血小板內容物是否會影響Treg細胞特性尚未得到探索。在這項研究中,我們發現含有 TGF-β1 的普通血小板裂解物 (pltLys) 有效地誘導了 Tconv 細胞中 Foxp3 的表達。普通 pltLys-iTreg 細胞的常見 Treg 細胞表面表型和體外抑制活性與純化 TGF-β1 (purTGFβ-iTreg) 細胞生成的 iTreg 細胞相似。然而,通過基因微陣列分析確定,pltLys-iTreg 和 purTGFβ-iTreg 細胞之間的基因表達存在顯著差異,尤其是在顆粒酶 B、干擾素 γ 和白細胞介素-2 中(分別相差 30.99 倍、29.18 倍和 17.94 倍)。根據這些基因特征,我們發現在重組人FVIII(rhF8)輸注后,與凝血因子VIII(FVIII)缺陷(F8null,血友病A模型)小鼠中的purTGFβ-iTreg細胞相比,pltLys-iTreg細胞改善了轉移后的細胞恢復和免疫抑制功能。在F8null小鼠中,急性抗體介導的血小板破壞,然后輸注rhF8,增加了Treg細胞的數量,并抑制了對rhF8的抗體反應。與這些數據一致,當用rhF8重新刺激時,來自血小板耗盡動物的F8特異性Treg細胞的離體增殖增加??傊覀兊臄祿砻鳎琾ltLys-iTreg細胞可能在新興的臨床應用中具有優勢,并且血小板含量會影響TGF-β1誘導的iTreg細胞的性質。


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數據圖片:

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原始論文:

1. TGF-β1 along with other platelet contents augments Treg cells to suppress anti-FVIII immune responses in hemophilia A mice.


背景介紹:

除了在止血中的基本作用外,血小板還調節先天性和適應性免疫反應.1-6 其免疫調節活性的基礎機制尚不清楚。血小板分泌

顆粒含有多種介導生理和病理過程的生物活性蛋白.7,8 每天大約有 1011 個新產生的血小板進入血液,取代那些老化或被破壞的

血小板。9-11 吞噬細胞清除凋亡血小板通過產生調節性細胞因子(包括轉化生長因子 β 1 (TGF-β1) 和白細胞介素-10

(IL-10))來產生免疫調節微環境,它們支持調節性 T (Treg) 細胞的發育和功能12-15。

在之前的研究中,我們證明了血小板中因子 VIII (FVIII) 或 FIX 的異位表達導致血小板 α 顆粒中 FVIII 或 FIX 的儲存,并誘導

血友病小鼠的抗原特異性免疫耐受.16-20 盡管介導血小板基因治療后免疫耐受的確切機制尚不清楚,但該過程可能是血小板內

容物所固有的, 因為血小板α顆粒也含有豐富的TGF-β1。事實上,TGF-β1在體內的來源是血小板.21血小板來源的TGF-β1

(pltTGFβ)在支持免疫耐受方面的生理相關性尚不清楚,并且由于儲存在血小板顆粒中的其他豐富的細胞因子和趨化因子

而變得復雜5,22。

pltTGFβ、其他血小板內容物和 Treg 細胞的特性之間可能存在重要聯系。我們假設 pltTGFβ 可以誘導常規 T (Tconv) 細胞成

為功能誘導調節性 T (iTreg) 細胞,并且血小板中的其他內容會影響 pltTGFβ 誘導的 Treg 細胞的性質。在這項研究中,我們

檢查了血小板裂解物 (pltLys) 在體外驅動 iTreg 細胞分化的能力。我們分析了 pltLys 產生的 iTreg 細胞的基因特征、Foxp3

表達的穩定性和抑制功能。我們還研究了血小板和Treg細胞的體內相關性以及它們在血友病A(FVIII缺陷,F8null)小鼠中對重

組FVIII(rhF8)輸注的反應中的免疫抑制功能。我們的數據顯示,pltTGFβ與其他血小板內容物一起在改變Treg細胞的基因表

達特征、促進Treg細胞穩定性和增強抗原特異性Treg細胞抑制功能方面發揮重要作用。



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